醋酸鈉的作用是什么?
原理舉例: 堿變性抽提質(zhì)粒DNA是基于染色體DNA與質(zhì)粒DNA的變性與復(fù)性的差異而達(dá)到分離目的。25g試樣三水醋酸鈉),置于潔凈且干燥的250mL錐形瓶中,加入20mL冰醋酸使之完全溶解,再加5mL乙suan酐,加結(jié)晶紫指示劑1滴,用0。在pH值高達(dá)12.6的堿性條件下,染色體DNA的氫鍵斷裂,雙螺旋結(jié)構(gòu)解開(kāi)而變性。質(zhì)粒DNA的大部分氫鍵也斷裂,但超螺旋共價(jià)閉合環(huán)狀的兩條互補(bǔ)鏈不會(huì)完全分離,當(dāng)以pH4.8的NaAc高鹽緩沖液去調(diào)節(jié)其pH值至中性時(shí),變性的質(zhì)粒DNA又恢復(fù)原來(lái)的構(gòu)型,保存在溶液中,而染色體DNA不能復(fù)性而形成纏連的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu),通過(guò)離心,染色體DNA與不穩(wěn)定的大分子RNA、蛋白質(zhì)-SDS復(fù)合物等一起沉淀下來(lái)而被除去。
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醋酸鈉的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)檢查
檢查:?。?)堿度取本品適量,用新沸放冷的水溶解并制成每1ml中含無(wú)水cu酸鈉30mg 的溶液,依法測(cè)定pH值應(yīng)為7.5~9.2。
(2)干燥失重取本品,在120℃干燥至恒重,減失重量應(yīng)為38.0%~41.0%。
(3)水中不溶物取本品適量(相當(dāng)于無(wú)水cu酸鈉20g),加水150ml,煮沸后水浴上加熱1小時(shí),倒入經(jīng)105℃干燥至恒重的G3垂熔漏斗,濾過(guò),并用水洗滌3次,每次105℃干燥至恒重,遺留殘?jiān)坏眠^(guò)10mg(0.05%)。
(4)氯化物取本品適量(相當(dāng)于無(wú)水cu酸鈉0.2g),依法檢查,與標(biāo)準(zhǔn)氯化鈉溶液7.0ml制成的對(duì)照液比較,不得更濃(0.035%)。
(5)硫酸鹽取本品適量(相當(dāng)于無(wú)水醋suan鈉10g)依法檢查,與標(biāo)準(zhǔn)硫酸鉀溶液5.0ml制成的對(duì)照液比較,不得更濃(0.05%)。
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